En la investigació biològica, normalment s'utilitzen polipèptids amb una seqüència llarga.Per als pèptids amb més de 60 aminoàcids en la seqüència, generalment s'utilitzen l'expressió gènica i SDS-PAGE per obtenir-los.Tanmateix, aquest mètode triga molt de temps i l'efecte de separació del producte final no és bo.
Reptes i solucions per a la síntesi llarga de pèptids
En la síntesi de pèptids llargs, sempre ens trobem davant d'un problema, és a dir, l'obstacle estèric de la reacció de condensació augmenta amb l'augment de la seqüència en la síntesi i el temps de reacció s'ha d'ajustar per completar la reacció.Tanmateix, com més llarg sigui el temps de reacció, més efectes secundaris es produeixen i es forma una part del pèptid objectiu.Aquests residus: les cadenes peptídiques deficients són impureses clau produïdes en la síntesi llarga de pèptids.Per tant, en la síntesi de pèptids llargs, el problema clau que hem de superar és explorar les condicions de reacció i els mètodes de reacció d'alta qualitat, per tal que la reacció de condensació d'aminoàcids sigui més completa i completa.A més, redueix el temps de reacció, perquè com més llarg sigui el temps de reacció, més reaccions secundaries incontrolables, més complexos són els subproductes.Per tant, es resumeixen els tres punts següents:
La síntesi de microones es pot utilitzar: Per a alguns aminoàcids trobats en el procés de síntesi que no són fàcils d'integrar, es pot utilitzar la síntesi de microones.Aquest mètode té resultats notables, redueix molt el temps de reacció i redueix la formació de dos subproductes clau.
Es pot utilitzar el mètode de síntesi de fragments: Quan alguns pèptids són difícils de sintetitzar mitjançant mètodes de síntesi comuns i no és fàcil de purificar, podem adoptar tota la condensació de diversos aminoàcids en un determinat segment del pèptid a la cadena peptídica en conjunt.Aquest mètode també pot resoldre molts problemes en la síntesi.
Es pot utilitzar la síntesi d'acilhidrazida: la síntesi d'acilhidrazida de pèptids és un mètode de síntesi en fase sòlida del pèptid Cys N-terminal i la reacció selectiva química del polipèptid C-terminal hidrazida entre la formació d'enllaços amida per aconseguir el mètode d'enllaç peptídic.A partir de la posició de Cys a la cadena peptídica, aquest mètode divideix tota la cadena peptídica en múltiples seqüències i les sintetitza respectivament.Finalment, el pèptid objectiu s'obté mitjançant la reacció de condensació en fase líquida.Aquest mètode no només redueix molt el temps de síntesi del pèptid llarg, sinó que també augmenta significativament la puresa del producte final.
Purificació llarga de pèptids
La particularitat dels pèptids llargs condueix inevitablement a components complexos de pèptids bruts.Per tant, també és un repte purificar pèptids llargs per HPLC.sèrie amiloide de procés de purificació de polipèptids, absorbint molta experiència i utilitzat amb èxit en la purificació de pèptids llargs.Mitjançant l'adopció d'equips nous, la barreja de múltiples sistemes de purificació, la separació repetida i altres mètodes d'experiència, la taxa d'èxit de la purificació de pèptids llargs es va millorar considerablement.
Hora de publicació: 18-abril-2023