A biológiai kutatásban általában hosszú szekvenciával rendelkező polipeptideket használnak. A szekvenciában több mint 60 aminosavú peptidek esetében a gén expresszióját és az SDS-PAGE-t általában használják azok előállításához. Ez a módszer azonban hosszú időt vesz igénybe, és a végtermék elválasztási hatása nem jó.
Kihívások és megoldások a hosszú peptid szintézishez
A hosszú peptidek szintézisében mindig egy problémával szembesülünk, azaz a kondenzációs reakció sztérikus akadályozása növekszik a szekvencia növekedésével a szintézisben, és a reakcióidőt be kell állítani, hogy a reakció teljes legyen. Minél hosszabb a reakcióidő, annál több mellékhatást eredményeznek, és a célpeptid egy része kialakul. Ilyen maradékok - A hiányos peptidláncok kulcsfontosságú szennyeződések, amelyeket hosszú peptid -szintézisben termelnek. Ezért a hosszú peptid szintézisében a legfontosabb probléma, amelyet meg kell küzdenünk, a magas színvonalú reakcióviszonyok és a reakció módszerek feltárása annak érdekében, hogy az aminosav -kondenzációs reakció átfogóbb és teljesebb legyen. Ezenkívül csökkentse a reakcióidőt, mivel minél hosszabb a reakcióidő, annál ellenőrizhetetlenebb oldali reakciók, annál bonyolultabb a melléktermékek. Ezért összefoglaljuk a következő három pontot:
Mikrohullámú szintézis használható: Néhány olyan aminosav esetében, amelyek a szintézis folyamatában tapasztaltak, amelyek nem könnyű integrálni, mikrohullámú szintézis használható. Ez a módszer figyelemre méltó eredményekkel rendelkezik, és jelentősen csökkenti a reakcióidőt, és csökkenti a két kulcsfontosságú melléktermék kialakulását.
Fragmentum szintézis módszer használható: Ha egyes peptideket nehéz szintetizálni közös szintézis módszerekkel, és nem könnyű tisztítani, akkor több aminosav teljes kondenzációját alkalmazhatjuk a peptid egy bizonyos szegmensében a peptidlánc egészére. Ez a módszer számos problémát is megoldhat a szintézis során.
Acil -hidrazid szintézis használható: A peptidek acil-hidrazid-szintézise az N-terminális Cys-peptid és a C-terminális polipeptid hidrazid kémiai szelektív reakciójának szilárd fázisú szelektív reakciója az amidkötések képződése között a peptid-kötési módszer elérése érdekében. A CYS peptidláncban való helyzete alapján ez a módszer az egész peptidláncot többszörös szekvenciára osztja, és szintetizálja azokat. Végül a célpeptidet folyadékfázisú kondenzációs reakcióval kapjuk meg. Ez a módszer nemcsak jelentősen csökkenti a hosszú peptid szintézis idejét, hanem jelentősen növeli a végtermék tisztaságát.
Hosszú peptidtisztítás
A hosszú peptidek sajátossága elkerülhetetlenül a nyers peptidek komplex alkotóelemeihez vezet. Ezért kihívást jelent a hosszú peptidek HPLC általi megtisztítására is. A polipeptid tisztítási folyamat amiloid sorozata, sok tapasztalat felszívása és a hosszú peptid tisztításában sikeresen felhasználva. Új berendezések elfogadásával, többszörös tisztító rendszerek keverésével, ismételt elválasztási és egyéb tapasztalati módszerekkel, a hosszú peptid tisztítás sikerességi sebessége jelentősen javult.
A postai idő: 2025-07-03