A leginkább hajlamos a HPLC hibákra és megoldásokra

Nagy pontosságú eszközként a HPLC könnyen zavaró kis problémákat okozhat, ha a használat során nem megfelelő módon működik. Az egyik leggyakoribb probléma az oszlop tömörítési problémája. Hogyan lehet gyorsan elhárítani a hibás kromatográfiát. A HPLC rendszer elsősorban tartály palackból, szivattyúból, injektorból, oszlopból, oszlophőmérsékletkamrából, detektorból és adatfeldolgozó rendszerből áll. Az egész rendszer számára az oszlopok, a szivattyúk és az érzékelők a legfontosabb alkatrészek és a fő helyek, amelyek hajlamosak a problémákra.

Az oszlopnyomás kulcsa az a terület, amelyre a HPLC használatakor nagy figyelmet kell fordítani. Az oszlopnyomás stabilitása szorosan kapcsolódik a kromatográfiás csúcs alakjához, az oszlop hatékonyságához, az elválasztási hatékonysághoz és a retenciós időhöz. Az oszlopnyomás stabilitása nem azt jelenti, hogy a nyomásérték stabil értéken stabil, hanem inkább az, hogy a nyomásingadozási tartomány 345 kPa vagy 50psi között van (lehetővé téve a gradiens elúció használatát, ha az oszlopnyomás stabil és lassan változik). A túl magas vagy túl alacsony nyomás egy oszlopnyomásprobléma.

A leginkább hajlamos a HPLC hibákra és megoldásokra

Az 1. ábrán a HPLC használatában a magas nyomás a leggyakoribb probléma. Ez azt jelenti, hogy a nyomás hirtelen emelkedését jelenti. Általában vannak a következő okok: (1) Általában ez az áramlási csatorna elzáródása. Ezen a ponton meg kell vizsgálnunk, hogy darabonként. a. Először vágja le a vákuumszivattyú bemeneti nyílását. Ezen a ponton a peek csövet folyadékkal megtöltöttük, így a peek cső kisebb volt, mint az oldószer palack, hogy megnézze, vajon a folyadék csöpögött -e. Ha a folyadék nem csöpög vagy lassan csöpög, az oldószer szűrőfeje blokkolva van. KEZELÉS: áztassa 30% salétromsavat fél órán át, és öblítse le ultra ultravizárral. Ha a folyadék véletlenszerűen csepegtet, akkor az oldószer szűrőfeje normális, és ellenőrzik; b. Nyissa ki a tisztítószelepet úgy, hogy a mozgó fázis ne halad át az oszlopon, és ha a nyomás nem csökken, akkor a szűrőfehér fej blokkolva van. Kezelés: A szűrt fehérfejeket eltávolítottuk és fél órán keresztül 10% izopropanollal ultrahanggal ultrahanggal ultrahanggal ultrahangoltuk. Feltételezve, hogy a nyomás 100psi alá esik, a szűrt fehér fej normális és ellenőrzik; c. Távolítsa el az oszlop kilépési végét, ha a nyomás nem csökken, az oszlop blokkolva van. Kezelés: Ha ez egy puffer sógátlás, akkor 95% -ot öblítsünk, amíg a nyomás normális. Ha az obstrukciót valami erősebben megőrzött anyag okozza, akkor a jelenlegi mozgófázisnál erősebb áramlást kell használni a normál nyomás felé történő rohanáshoz. Ha a hosszú távú tisztítási nyomás a fenti módszer szerint nem csökken, akkor az oszlop bemeneti és kimeneti pontja ellenkezőleg a műszerhez való csatlakoztatásnak tekinthető, és az oszlop megtisztítható a mobil fázissal. Ebben az időben, ha az oszlopnyomás még mindig nem csökken, az oszlopbejárat szitemezlemezét csak cserélhető, de ha a művelet nem jó, könnyű vezetni az oszlophatás csökkentéséhez, ezért próbáljon kevesebbet használni. A nehéz problémák esetén az oszlopcsere mérlegelhető.

(2) Helytelen áramlási sebesség beállítása: A helyes áramlási sebesség visszaállítható.

(3) Helytelen áramlási arány: Az áramlások különböző arányának viszkozitási indexe eltérő, és a nagyobb viszkozitású áramlás megfelelő rendszernyomása szintén nagyobb. Ha lehetséges, az alacsony viszkozitású oldószerek cserélhetők vagy újra beállíthatók és elkészíthetők.

(4) Rendszernyomás nulla sodródás: Állítsa be a folyadékszint -érzékelő nullát.

A 2. ábrán a nyomást túl alacsony (1) általában a rendszerszivárgás okozza. Mi a teendő: Keresse meg az egyes kapcsolatokat, különösen az oszlop mindkét végén, és húzza meg a szivárgás területét. Távolítsa el az oszlopot, és húzza meg vagy vonja be a PTFE filmet megfelelő erővel.

(2) A gáz belép a szivattyúba, de a nyomás általában instabil, ebben az időben, magas és alacsony. Sokkal komolyabb, hogy a szivattyú nem lesz képes felszívni a folyadékot. Kezelési módszer: Nyissa ki a tisztítószelepet és tisztítsa meg 3 ~ 5 ml/perc áramlási sebességgel. Ha nem, akkor a légbuborékokat a kipufogószelepnél egy dedikált tűcső segítségével szívjuk meg.

(3) Nincs mozgófázisú kiáramlás: Ellenőrizze, hogy van -e mozgófázis a rezervoár palackban, hogy a mosogató belemerül -e a mobil fázisba, és a szivattyú fut -e.

(4) A referenciaszelep nem zárva van: a referenciaszelep lassulás után zárva van. Ez általában 0,1 -re csökken. ~ 0,2 ml/ perccel a referenciaszelep bezárása után.

Összegzés:

Ebben a cikkben csak a folyadékkromatográfia gyakori problémáit elemezzük. Természetesen gyakorlati alkalmazásunkban további további problémákkal fogunk szembesülni. A hibakezelés során a következő alapelveket kell követnünk: csak egy tényezőt változtatnánk egyszerre a hipotetikus tényező és a probléma közötti kapcsolat meghatározására; Általában a hibaelhárításhoz szükséges alkatrészek cseréjekor figyelmet kell fordítanunk arra, hogy a lebontott érintetlen alkatrészeket visszahelyezzük a hulladék megelőzése érdekében; A jó nyilvántartási szokás kialakítása a hibakezelés sikerének kulcsa. Összegezve, a HPLC használatakor fontos figyelmet fordítani a kezelés előzetes kezelésére, valamint a berendezés megfelelő működésére és karbantartására.