A foszforiláció módosítása döntő szerepet játszik a sejtek életében, és több szempontot befolyásol. A fehérjék foszforilációja szorosan kapcsolódik a különféle biológiai folyamatokhoz, például a DNS -károsodás javításához, a transzkripciós szabályozáshoz, a szignál -transzdukcióhoz és a sejt apoptózisának szabályozásához. A foszforilált fehérjék és peptidek tanulmányozása elősegíti ezen folyamatok mechanizmusainak feltárását és elmélyíti az élettevékenységek lényegének megértését. A hong peptid biotechnológiája érett foszforilációs peptid jelölési technológiával rendelkezik. A saját technológiai és alapanyag-előnyeinek kihasználásával szintetizálhatjuk a foszforilált szerin (PSER), foszforilált treonint (PTHR) és foszforilált tirozint (PTYR) tartalmazó peptideket, és kiváló minőségű peptideket biztosítunk egy-öt foszforilációs helyszínen.
A foszforilációs jelölési technológia áttekintése:
A foszforilált peptidek elsősorban a szerin (SER), a tirozin (Tyr) és a treonin (THR) maradékai oldallánc -hidroxilcsoportjaira vonatkoznak a peptidláncban savas foszfát -észterekké módosított peptidláncban. A foszforilált peptidek döntő szerepet játszanak a fehérje foszforilációjának vizsgálatában. Ezért különösen fontos a fehérjék és peptidek foszforilációs reakcióinak mély feltárása, valamint érett és egyszerű szintetikus módszerek megtalálása.
Jelenleg a peptidek foszforilációs módosításának módszerei elsősorban két kategóriába tartoznak:
(1) A megfelelően védett foszforilált aminosavakat közvetlenül beépítse a peptid szekvenciába:
Először is, a foszforilálandó aminosavakat (például Thr, Ser vagy Tyr) foszforilációs kezelésnek vetik alá és megfelelően védik. Ezután a hagyományos szilárd fázisú peptid-szintézis (SPPS) folyamat után a foszforilált monomerek kapcsolódnak a polipeptid specifikus helyeihez. Ez a módszer egyszerűen működik, és a peptidek pontfoszforilációs módosításának egyik fő technikájává vált.
(2) A gyanta polipeptid -szekvenciájának szintetizálása után a SER, Tyr vagy THR oldallánc -hidroxilcsoportjai foszforilálódnak:
A foszforilációs módosítás elvégzésekor, ha a foszforilált monomerek polipeptidbe történő közvetlenül kondenzálásának módszerét alkalmazzuk, a foszforilált aminosav nagyobb oldallánca miatt a szterikus akadályok növekedését okozza, és megnehezíti a kondenzációt a peptidlánccal. Ezenkívül a későbbi aminosavak bevezetése szintén viszonylag összetetté válik, különösen akkor, ha több foszforilációs hely van. A szintézis eljárása rendkívül nehéz lesz, és a végtermék nagyon összetett lesz, megnehezítve az elválasztást, és a hozam rendkívül alacsony. Ezért, ha több olyan hely van, amelyek foszforilációt igényelnek a polipeptid láncban, akkor először a polipeptid -szekvencia szintézisének befejezését lehet elvégezni a gyantán, majd foszforilálja a SER, Tyr vagy THR oldallánc -hidroxilcsoportjait. E folyamat során először szelektíven távolítsa el a címkézendő aminosav -oldallánc védelmező csoportjait. Tyr és THR esetében az oldalsó láncok nem védett aminosavai közvetlenül reagálhatnak. Az oldallánc -védelmi csoportokat kvantitatív módon távolíthatjuk el 1% TFA/DCM állapotban. Ebben a módszerben a bisz-benzil-foszforamidát és a tetrazol aktív közbenső terméke előállítható az utóbbi reakciójával, és összekapcsolható a hidroxilcsoporttal. Ezután egy oxidációs reakció peroxid savviszonyok mellett végezhető a foszfonilcsoport előállításához, a foszforiláció befejezéséhez.
A postai idő: 2025-07-16