A peptidek kémiai szintézisét követően szilárd fázisú FMOC segítségével számos hasítási módszer létezik, és most két alaptípust vezetünk be, amelyeket általában használunk.
1. Erős sav módszer (TFA)
A száraz gyantát rázott lombikba helyeztük, és hozzáadunk megfelelő mennyiségű fészkelőt. (Scavengers) Trifluor-ecetsav-vágó reagens (TFA), 10-25 ml/g gyanták, korlátozott és rázott szobahőmérsékleten rotációval rotatva. A gyantát leürítettük, 2-3 alkalommal mostuk új TFA-val, a szűrletet kombináltuk, és a jég-dietil-éter térfogatának 8-10-szerese leesettünk. Időnként néhány TFA párolható, hogy nyers peptid csapadékot kapjon. Az éter felhasználható a csapadék hatékonyságának növelésére jéggel segített hűtéssel. Végül összegyűjtöttük a csapadékos nyers peptid terméket.
Megfelelő gyanta: Wang gyanta vagy jégpályát amid gyanta
2, gyenge sav módszer (TFA vagy ecetsav -hígítás) 1% TFA:
1 g gyantát tartalmazó peptideket adunk egy 1%TFA -t tartalmazó diklór -metán oldat üvegrázó lombikjához, lezárt és 2 percig rázva. A szűrletet nitrogénnel préseltük egy újabb új metanol -rázó lombikba, amely 10% piridint tartalmaz, és az eljárást tízszer megismételjük. A gyantán maradt védőpeptideket háromszor mostuk 30 ml DCM és 30 ml MeOH alkalmazásával. A maradékokat TLC vagy HPLC segítségével ellenőriztük és megtisztítottuk. Az összes szűrletet kombináltuk, és az oldószer 5% -át csökkentett nyomáson főztük. Negyven ml vizet adunk hozzá, és a csapadékot segítették a hűtő keverékben. A szűrés után a terméket háromszor mossuk tiszta vízzel, vákuumszárító sütőbe helyezzük, és KOH -val vagy P2O5 -mel szárítottuk.
Híg ecetsav:
A gyantára lógott peptideket 2 órán át vágóoldattal kezeltük AcOH // TFE/DCM (2: 2: 6) alkalmazásával, a gyantát kiszűrjük, és a gyantát háromszor mostuk vágóoldattal. A felesleges ecetsavat úgy távolítottuk el, hogy 15-szeres N-hexánt adunk a vegyes szűrlethez és a forgó oldódáshoz.
Alkalmazási gyanta: 2-CTC gyanta
A postai idő: 2025-07-01